液相色譜柱是由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。
液相色譜柱日常使用保養(yǎng):
· 使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)
· 注意色譜的pH范圍,大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-8
· 避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
· 使用HPLC級(jí)試劑,流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
· 如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢將柱子沖洗干凈并保存在乙-腈中
· 壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào)
· 確認(rèn)流動(dòng)相中緩沖鹽的溶解性
· 確認(rèn)樣品在流動(dòng)相中的溶解性
· 避免壓力的突變
液相色譜柱的保存:
1.反向色譜柱實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):
用含鹽緩沖液或流動(dòng)相后,用10%甲醇/水沖洗30分鐘,洗去色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不要用純水沖洗塔,應(yīng)在水中加入10%的甲醇,以防止填料倒塌。
2.長(zhǎng)期保存色譜柱:
例如,色譜柱若要長(zhǎng)期保存,必須保存在合適的溶劑中,反相柱可以儲(chǔ)存在純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存在嚴(yán)格脫水的純正己烷中。離子交換柱可以儲(chǔ)存在水中(含防腐劑、硫柳汞),并在室溫下堵塞插頭。
液相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。